El 2 de septiembre de 1541. Llegan a Asunción los habitantes de Buenos Aires, que ha sido despoblada.
El 2 de septiembre de 1541 marcó una etapa decisiva en la consolidación de Asunción como principal centro de la conquista española en la región del Río de la Plata.
Ante las difíciles condiciones de la primera Buenos Aires, afectada por hambre, enfermedades y enfrentamientos con los pueblos indígenas, Domingo Martínez de Irala impulsó su despoblamiento y la concentración de los sobrevivientes en Asunción.
La llegada de numerosos pobladores procedentes de Buenos Aires fortaleció considerablemente el asentamiento asunceno y aumentó su importancia política, militar y económica.
Pocas semanas después, el 16 de septiembre de 1541, fue establecido oficialmente el Cabildo de Asunción, consolidando la organización civil de la ciudad.
A partir de entonces, Asunción se convirtió en la principal base española de la región y en punto de partida de numerosas expediciones fundadoras, razón por la cual sería recordada posteriormente como la «Madre de Ciudades».